Skip to content

Nerwiakowłókniakowatość typu 1 ze względu na mozaikę linii germinalnej u klinicznie normalnego ojca ad

3 tygodnie ago

446 words

Lista znaczników odpowiada kolejności alleli dla haplotypów pokazanych poniżej każdego symbolu. Haplotyp dwojga rodzeństwa z neurofibromatozą typu 1, który nie ma allelu ojcowskiego (oznaczonego kreską) jest zapakowany w pudełka. W przypadku markerów IVS27AAAT2.1 i IVS27AC33.1 oba potomstwo odziedziczyło ojcowskie (2 i 6) i matczyne (2 i 5) allele, ale w przypadku IVS38GT53.0 odziedziczyły one wyłącznie allel macierzyński (2). Panel B przedstawia analizę DNA limfocytów od członków rodziny z markerem IVS38GT53.0, ujawniającym brak ojcowskich alleli u potomstwa z neurofibromatozą typu 1. Ojciec (I-1) jest heterozygotą pod względem polimorfizmu, mając allele 4 i 5, a matka (I-2) ma allele 2 i 5. Ich normalna córka (II-3) odziedziczyła allele 4 i 5, podczas gdy dwa potomstwo z neurofibromatozą typu (II-1 i II-2) otrzymało wyłącznie allel matczyny (2). W ramach naszej pracy w zakresie poradnictwa genetycznego i diagnozy neurofibromatozy typu przeanalizowaliśmy 130 rodzin z chorobą od 1990 r. – 128 z Hiszpanii i 2 z Włoch. Przypadki nerwiakowłókniaka typu rozpoznano standardowymi kryteriami1,2. DNA z krwi obwodowej uzyskano od każdego członka rodziny14. W omawianej tutaj rodzinie (ryc. 1) DNA uzyskano również z plemników ojca.
Analiza mikrosatelitarna
Kilka markerów mikrosatelitarnych (krótkie sekwencje powtórzeń tandemowych), zlokalizowanych w intronowych regionach genu NF1 (IVS27AAAT2.1 i IVS27AC33.1 w intronie 27 i IVS38GT53.0 w intronie 38), analizowano przez niezależną amplifikację reakcji łańcuchowej polimerazy, jak wcześniej opisano15-17. Ustalono ojcostwo, analizując pięć mikrosatelitów (D1S117, D6S89, D11S35, APOC2 i D21S168) zlokalizowanych na różnych chromosomach18.
Analiza Southern Blot
W elektroforezie w żelu pulsacyjnym 0,5 miliona świeżych ludzkich limfocytów osadzono w czopach agarozowych i poddano lizie; DNA następnie strawiono BamHI, ClaI i XhoI (New England Biolabs) 19. Fragmenty DNA rozdzielano za pomocą elektroforezy pulsacyjnej w 1,2% żelu agarozowym za pomocą buforu do elektroforezy TRIS-boran-EDTA (45 mM boranu TRIS i mM EDTA) w temperaturze 4 ° C. Rozdzielanie fragmentów DNA w zakresie od 5 do 60 kb osiągnięto po 4 godzinach elektroforezy przy 450 V z pulsowaniem razy 0,3 sekundy przez godzinę, 0,5 sekundy przez godzinę i 0,65 sekundy przez 2 godziny z Pulsaforem LKB (Pharmacia).
W przypadku hybrydyzacji typu Southerna bez pulsu 5 .g DNA trawiono EcoRI, Hindlll, Pstl i MspI, a fragmenty rozdzielano na 0,8% żelu agarozowym. Po blotowaniu filtry nylonowe hybrydyzowano z komplementarnymi sondami NF1 DNA (cDNA) AE25 i P5,5, jak również z indywidualnymi sondami egzonowymi NF1. Hybrydyzację i autoradiografię przeprowadzono jak opisano wcześniej20. Analizę densytometryczną autoradiogramów przeprowadzono na densytometrze Preference HR (Sebia).
Wyniki
Dane kliniczne
Obydwoje dotknięte chorobą mieli klinicznie ciężką postać neurofibromatozy typu 1. Dotknięta córką miała plamki kawy i plamki i pieluchy tuż po urodzeniu. Od 12 roku życia miała kilka nerwiakowłókniaków skórnych i dwóch plexiform
[więcej w: fala uderzeniowa przeciwwskazania, gitary elektryczne allegro, objaw kussmaula ]

0 thoughts on “Nerwiakowłókniakowatość typu 1 ze względu na mozaikę linii germinalnej u klinicznie normalnego ojca ad”

Powiązane tematy z artykułem: fala uderzeniowa przeciwwskazania gitary elektryczne allegro objaw kussmaula